DNA 拷贝数计算器
根据 DNA 片段长度和明确的分子量假设，在 DNA 质量与拷贝数之间快速双向换算。
计算 DNA 质量、拷贝数与浓度
本计算器使用的假设
如何使用本计算器
很多竞品要么只停留在 pmol，要么把拷贝数计算过程藏起来。本页把关键步骤直接展开。
选择 DNA 类型
质粒、PCR 产物、线性双链片段请选择 dsDNA；单链模板请选择 ssDNA 或 ssRNA。
输入长度
dsDNA 请输入 bp 长度，ssDNA/ssRNA 请输入 nt 长度。
输入质量或拷贝数
选择换算方向，然后输入 DNA 质量或拷贝数。
需要时补充体积
如果还要估算工作液浓度，请补充体积，系统会给出 copies/µL 和 ng/µL。
公式与变量说明
本计算器把核心数学关系直接展开。质量转拷贝数时，从 ng/µL 的 DNA 浓度出发；拷贝数转质量时，则使用同一套长度和单链/双链分子量假设反推。
其中 C 为 ng/µL 浓度，L 为片段长度，W 为每个 bp 或 nt 的平均分子量，10⁹ 用于把 ng 换算成 g。
仍然使用同样的长度和分子量假设，最后乘以 10⁹，把结果从 g 转回 ng。
当你想得到 copies/µL 时，这里应填入实测 stock 浓度，单位为 ng/µL。
应使用完整分子长度。对质粒来说，是 backbone 加 insert 的总长度，而不是只填 insert。
dsDNA 用 660 g/mol/bp，ssDNA 用 330 g/mol/nt，ssRNA 用 340 g/mol/nt；若需要精确分子量，应改用按序列计算的工具。
6.022×10²³ molecules/mol，用于把摩尔质量和实际分子数连接起来。
假设与限制
本计算器刻意采用简洁、可审阅的湿实验近似模型，方便快速复核。
- dsDNA 按每个碱基对 660 g/mol 估算。
- ssDNA 按每个核苷酸 330 g/mol 估算。
- ssRNA 按每个核苷酸 340 g/mol 估算。
- 精确分子量会受碱基组成、末端化学状态和修饰影响。
带数据的示例计算
下面的例子按照实验里最常见的问题来展开：先算 stock 的 copies/µL，再在已知目标分子数时反算所需质量。
示例 1：4.7 Mb dsDNA，浓度 150 ng/µL
实测 stock 浓度 = 150 ng/µL，完整模板长度 = 4,700,000 bp，分子类型 = dsDNA，因此 W = 660 g/mol/bp。
这个 stock 大约含有 2.91×10⁷ copies/µL。
在做标准曲线、spike-in 或绝对定量对照之前，通常首先需要得到这个 copies/µL 数值。
示例 2：500 bp dsDNA 的 1×10⁹ copies 对应多少质量？
目标分子数 = 1×10⁹，片段长度 = 500 bp，分子类型 = dsDNA，因此仍然使用 660 g/mol/bp 的假设。
所需 DNA 质量约为 0.548 ng。
这个结果故意很小，说明低拷贝标准品通常不靠直接称量，而是从高浓度 stock 逐级稀释得到。
算出拷贝数之后，下一步往往是配工作液
当你已经知道 stock 的 copies/µL，接下来最常见的问题就是该加多少 stock、多少水。这一步和 dilution 页面使用的是同一套逻辑。
这里把拷贝数浓度当作浓度单位处理。Ctarget 是目标 copies/µL，Vfinal 是最终反应或分装体积，Cstock 是实测 stock 的 copies/µL。
示例 3：配置 10 µL、2.0×10⁶ copies/µL 的工作液
沿用示例 1 的 stock，因此 Cstock = 2.91×10⁷ copies/µL。目标浓度 = 2.0×10⁶ copies/µL，最终体积 = 10 µL。
需要加入 0.687 µL stock，再补 9.313 µL 水。
如果算出来的 stock 体积太小，不利于准确移液，建议先配一个中间稀释液，再去配最终工作液。
在真正相信结果前，先检查这三点
质粒请填写完整质粒长度。若只填 insert 长度，会把拷贝数高估。
不要在同一套实验里来回切换 dsDNA、ssDNA 和 ssRNA 假设。标准曲线和汇报值应统一口径。
如果你要的是寡核苷酸精确分子量，请进一步考虑碱基组成、修饰以及末端化学状态。
常见问题
质粒、PCR 产物和其他双链片段选 dsDNA；单链模板、探针或寡核苷酸选 ssDNA。
因为不同工具采用的分子量假设不同。有些用 660 g/mol/bp 的近似值，有些会进一步考虑碱基组成或末端修正。
不是。只有在你需要 copies/µL 或 ng/µL 这类浓度结果时才需要填写体积。
可以做快速估算，但若需要精确值，应使用考虑实际序列、修饰和末端状态的专门分子量工具。
实验提示
整套标准曲线应保持同一种 DNA 类型与分子量假设，避免内部不一致。
请使用完整质粒长度，而不是仅使用插入片段长度。
如果同事给的是 copies，而你需要回算质量，最好确认对方使用的片段长度和假设。
本页参考了 Omni Calculator 的 DNA copy number 页面，但最终按本网站 dilution 页面的教学方式重排：先给公式，再给真实代入数字，最后讲如何继续配工作液。