缓冲液计算器:Phosphate、Tris、Citrate、Acetate、PBS 和 TBS

根据 pH、pKa、总浓度和最终体积计算缓冲液配方,也可以直接按体积缩放 PBS、TBS、TE 和 TAE 常用配方。

缓冲液计算器

配方结果

酸式组分
2.354e+3 mg NaH2PO4 anhydrous
碱式组分
4.313e+3 mg Na2HPO4 anhydrous
碱 / 酸比例
1.549
适用范围
pH 6.2-8.2

示例:sodium phosphate buffer

要配 500 mL、100 mM、pH 7.40 的 sodium phosphate buffer,pKa = 7.21,因此 base/acid = 10^(7.40 - 7.21) = 1.55。

ratio=10^(pH - pKa)=1.55
总缓冲物质的量 = 0.05 mol。酸式组分 NaH2PO4 = 0.0196 mol;碱式组分 Na2HPO4 = 0.0304 mol。对应约 2.35 g 酸式盐和 4.31 g 碱式盐,之后仍需实测 pH。

为什么不同 buffer 选项的公式略有不同

Phosphate、acetate、citrate、carbonate、MES、HEPES、MOPS 更适合按共轭酸碱对使用 Henderson-Hasselbalch 计算。

Tris-HCl 常见做法可以是 Tris base + Tris-HCl 混合,也可以溶解 Tris base 后用 HCl 滴定;Tris 的 pKa 对温度变化更敏感。

PBS、TBS、TE、TAE 更像常用实验配方,通常按已知 formulation 缩放,再调 pH 并补足体积。

使用配方前先检查这些点

核对试剂瓶上的水合形式和分子量。二水合物与无水盐不能直接按同一克数替换。
先用约 80-90% 最终体积的水溶解,必要时在使用温度附近调 pH,最后再补足体积。
高离子强度或温度敏感实验中,本工具应作为初始配方,最终仍要用校准 pH 计验证。
页面设计说明

本页吸收竞品中真正有用的设计:Sigma 风格的 raw material 选择、Liverpool 风格的 pH/温度意识,以及 Boston BioProducts 对 mass-by-concentration 和 Henderson-Hasselbalch 的解释方式。