微生物学・発酵細胞培養
大腸菌・酵母・枯草菌モデル
吸光度計線形性QC
OD600計算機｜菌体濃度・細胞数換算
OD600、希釈倍率、測定試料量を入力して、設定した換算係数による菌体濃度や細胞数を計算します。
OD600 菌体数・バイオマス計算機
分光光度計のOD600から細胞数/mL、培養液中の総細胞数、乾燥菌体重量（DCW）を推定します。
内蔵のODあたり細胞数・乾燥重量係数は概算値です。菌株、培地、容器、測定器に合わせて校正してください。独自の校正曲線がある場合は「カスタム生物種 / 校正」を使用します。
補正後OD600
0.450
Direct measurement
細胞濃度
3.60 × 10⁸ /mL
3.60e+8cells/mL
培養液中の総細胞数
1.80e+11
In 500mLの培養液
乾燥菌体重量（DCW）
0.176 g/L
合計: 0.088 g 乾燥 バイオマス
推定増殖段階：
対数増殖期（指数増殖期）
細胞は活発な指数増殖期にあります。
モデル：Escherichia coli (Bacteria)
OD600から菌体濃度を求める方法
600 nm における吸光度（OD600）は、培養液中の微生物菌体密度を推定するための標準的手法です。試薬や核酸の真の光吸収とは異なり、OD600 は菌体粒子による光散乱（濁度）を測定しています。
| 微生物種 | 菌体数 / mL (OD=1.0) | 乾燥菌体重量 (DCW) | 湿重量 (Wet Weight) | 典型的な実験ステージ |
|---|---|---|---|---|
| Escherichia coli | 8.0 × 10⁸ cells/mL | 0.39 g/L | ~1.7 g/L | IPTG誘導：OD 0.6–0.8 |
| Saccharomyces cerevisiae | 3.0 × 10⁷ cells/mL | 0.50 g/L | ~2.2 g/L | 初期対数期：OD 0.5–1.0（形質転換） |
| Bacillus subtilis | 5.0 × 10⁸ cells/mL | 0.36 g/L | ~1.5 g/L | コンピテント調製：OD 0.8 |
| Pichia pastoris | 5.0 × 10⁷ cells/mL | 0.65 g/L | ~3.0 g/L | 高密度メタノール誘導発現 |
測定値と希釈倍率
OD600の線形測定範囲は、測定器、キュベットの光路長、菌体、培養条件によって異なります。0.1〜0.8は実用的な目安ですが、試料を希釈して測定系の直線性を確認してください。
高濁度での非線形応答（概念図）
Beer-Lambert則からの偏差
未希釈試料のOD600が約0.8を超えると、直線性から外れる場合があります。偏差は測定器と試料に依存します。培地で約0.1〜0.6に希釈し、希釈補正後のODが希釈倍率間で一致するか確認してください。
OD > 0.8: 多重散乱による過小評価
高密度では散乱光が別の菌体によって再散乱されて受光部に入射し、真の菌体密度を過小評価する原因になります。
推奨プロトコル：希釈測定
濃い培養液はブランク培地で1:5または1:10に希釈し、測定値を0.1〜0.6の線形領域に収めた上で希釈倍率を乗じます。
計算例
計算実例：1L三角フラスコ大腸菌BL21(DE3)誘導時の菌数・バイオマス算定
培養液100 µLをLB培地900 µLに希釈（10倍希釈、DF = 10）し、分光光度計でOD600 = 0.28を測定。
- 1. 真の補正OD値 = 0.28 × 10 = 2.80
- 2. 菌体濃度 = 2.80 × 8×10⁸ = 2.24 × 10⁹ cells/mL
- 3. 1 L全菌数 = 2.24 × 10⁹ cells/mL × 1000 mL = 2.24 × 10¹² cells
- 4. 乾燥菌体重量 = 2.80 × 0.39 g/L = 1.092 g DCW
よくある質問
OD600から菌体濃度はどのように計算しますか？
OD600に画面で選択した生物種または入力した換算係数を適用し、希釈倍率を反映して計算します。
換算係数はすべての菌株で共通ですか？
いいえ。換算係数は生物種、菌株、測定条件などで異なり得ます。必要に応じて実験系に合わせた係数を設定してください。
希釈して測定した場合はどう入力しますか？
測定値と希釈倍率をそれぞれ入力します。ツールは希釈倍率を使って補正値を計算します。
OD600は生菌数を直接測定しますか？
OD600からの細胞数は換算係数に基づく推定値です。生菌数を求める測定とは区別して解釈してください。